產(chǎn)品編號 | C6108 |
英文名稱 | RNase H |
中文名稱 | 核糖核酸酶H |
別 名 | Ribonuclease H; RnaseH; RNA酶H; |
克 隆 號 | |
CAS | |
理論分子量 | kDa |
檢測分子量 | |
保存條件 | -20?C,有效期24個(gè)月. |
注意事項(xiàng) | This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications. |
產(chǎn)品介紹 |
產(chǎn)品簡介: 核糖核酸酶H (RNase H) 是一種核酸內(nèi)切酶,可特異性地水解與DNA雜交的RNA的磷酸二酯鍵,產(chǎn)生具有游離5’-P和3’-OH末端的產(chǎn)物。該酶不能降解單鏈核酸、雙鏈DNA或雙鏈RNA。用于cDNA第二鏈合成前去除mRNA,DNA-RNA雜交體的鑒定,在Oligo(dT) 存在下去除mRNA 的poly(A)尾。 單位定義: 1單位指50μl反應(yīng)體系中,37℃條件下,20min內(nèi)從40pmol 長度為25bp的RNA-DNA雜交鏈中水解出1nmol核酸底物所需的酶量。 產(chǎn)品組份: RNase H (60 U/μl): 10 μl 5x RNase H Buffer: 300 μl (5 x RNase H Buffer 成分:500 mM TrisCl (pH 8.3 at 25°C),30 mM MgCl2,750 mM KCl,100 mM DTT) 操作步驟: 1. 在一無菌離心管中配制以下反應(yīng)液: DNA-RNA雜合體: 0.5~5 μg 5x RNase H Buffer: 10 μl RNase H (60 U/μl): 1 μl DEPC-ddH2O: 補(bǔ)足體積至50 μl 2. 30°C反應(yīng)1小時(shí)。 3. 加入5 μl的3 M NaOAc (pH5.2)。 4. 加入125 μl的預(yù)冷無水乙醇,-20°C放置30~60分鐘。 5. 離心回收沉淀,用預(yù)冷的70%乙醇清洗沉淀,真空干燥后備用。 注意事項(xiàng): 該酶的最佳反應(yīng)溫度為37°C,65°C 20min使該酶失活。 |