產(chǎn)品編號 | C6208 |
英文名稱 | Blood Genome DNA Extraction Kit with columns (0.1-1ml) |
中文名稱 | 柱式全血基因組DNA提取試劑盒 |
別 名 | 柱式血液基因組DNA小量提取試劑盒; |
克 隆 號 | |
CAS | |
理論分子量 | kDa |
檢測分子量 | |
保存條件 | 室溫干燥可保存一年,4℃保存可更長時間。 |
注意事項 | This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications. |
產(chǎn)品介紹 |
產(chǎn)品簡介 本試劑盒適用于各種新鮮及抗凝劑(檸檬酸鈉、EDTA等)處理過的全血基因組DNA提取。無需去除紅細胞,直接裂解血細胞,DNA特異吸附到硅膠膜上,通過簡單漂洗去除雜質(zhì),可快速純化得到基因組DNA。使用本試劑盒得到的血液基因組DNA無蛋白、核酸酶污染,可直接進行PCR、酶切和雜交等分子生物學實驗。 產(chǎn)品組份 Buffer GB: 12 ml/50 ml (50T/200T) Buffer WB1: 13 ml/52 ml (50T/200T) Buffer WB2: 15 ml/60 ml (50T/200T) Buffer EB: 10 ml/30 ml (50T/200T) Proteinase K **: 1 ml/4×1 ml (50T/200T) Spin Column With Collection Tubes: 50/200 (50T/200T) ** Proteinase K(蛋白酶K):可常溫運輸,開蓋后防止空氣及槍頭污染;為了保證長期使用,建議將其放入-20℃保存。如果出現(xiàn)絮狀物,是因為溶解緩沖液中的鈣離子在磷酸鹽中可能會產(chǎn)生不溶解性沉淀,離心取上清,不影響使用效果。 自備試劑 無水乙醇、RNase A(可選)。 產(chǎn)品優(yōu)勢 1. 適用范圍廣:可從抗凝血、白膜層和禽類血等樣品中直接提取DNA; 2. 操作簡便:無需有機試劑沉淀,可快速獲得高純度的血液基因組DNA; 3. 純度高:去除污染物和抑制劑徹底,便于下游應(yīng)用。 注意事項 1. 如Buffer GB和Buffer WB1產(chǎn)生沉淀,可在56℃水浴溶解; 2. 樣品應(yīng)避免反復(fù)凍融,否則會導(dǎo)致提取的DNA片段小,提取量下降; 3. 所有離心步驟均為臺式離心機,室溫下操作。 操作步驟 注意:使用前請先在緩沖液Buffer WB1和Buffer WB2中加入無水乙醇,加入體積請參照瓶上的標簽。 1. 在1.5 ml滅菌離心管中加入20 ul Proteinase K,200 ul哺乳動物鮮血或抗凝血。 注意:如果處理血樣為禽類、鳥類、兩棲類或更低級生物的抗凝血液,其紅細胞為有核細胞,因此處理量5-20 ul,可加緩沖液PBS或生理鹽水補足200 ul后進行下面的裂解步驟,如要去除RNA,可加入4 ul RNase A(100 mg/ml),混勻,靜置5 min。 2. 加入200 ul Buffer GB,渦旋混勻15 sec,56℃水浴10 min。 注意:期間每隔一段時間震蕩離心管,至溶液變得清亮。 3. 加入200 ul無水乙醇,充分震蕩,短暫離心以去除管蓋內(nèi)壁液體。 4. 將吸附柱放入收集管,將上一步所得溶液全部加入吸附柱中,12,000 rpm離心1 min,棄收集管中濾液。 5. 向吸附柱內(nèi)加入500 ul Buffer WB1,室溫12,000 rpm離心30 sec,棄收集管中濾液。 注意:按要求在Buffer WB1中加入無水乙醇,用后及時蓋緊,以防乙醇揮發(fā)。 6. 向吸附柱內(nèi)加入600 ul Buffer WB2,室溫12,000 rpm離心30 sec,棄收集管中濾液。 注意:Buffer WB2是濃縮液,按要求加入無水乙醇,用后及時蓋緊,以防乙醇揮發(fā)。 7. 向吸附柱內(nèi)加入500 ul Buffer WB2,室溫12,000 rpm 離心2 min,棄收集管中廢液。 注意:此步不能省略,否則殘留乙醇會影響基因組DNA的后續(xù)使用。 8. 將離心吸附柱置于一個新的1.5 ml塑料離心管(自備)中,加入50-100 ul Buffer EB,室溫放置2 min,12,000 rpm 離心1 min,離心管底溶液即基因組DNA。 注意:為增加洗脫效率,可將洗脫液Buffer EB在60℃預(yù)熱。如需使用去離子水洗脫,可用NaOH調(diào)整其pH值在7.0-8.5之間,為了增加回收率,可將得到的溶液重新加入到吸附柱中,室溫放置2 min,再次離心收集。 |
1、抗體溶解方法 | |
2、抗體修復(fù)方式 | |
3、常用試劑的配制 | |
4、免疫組化操作步驟 | |
5、免疫組化問題解答 | |
6、Western Blotting 操作步驟 | |
7、Western Blotting 問題解答 | |
8、關(guān)于肽鏈的設(shè)計 | |
9、多肽的溶解與保存 | |
10、酶標抗體效價測定程序 | |