| 產(chǎn)品編號 | C6204 |
| 英文名稱 | DNA Purification Kit |
| 中文名稱 | DNA產(chǎn)物純化試劑盒 |
| 別 名 | PCR & DNA Fragment Purification Kit; DNA Product Purification Kit; PCR片段純化試劑盒; PCR純化Kit; |
| 克 隆 號 | |
| CAS | |
| 理論分子量 | kDa |
| 檢測分子量 | |
| 保存條件 | 室溫干燥可保存一年，4℃保存可更長時間。 . |
| 注意事項(xiàng) | This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications. |
| 產(chǎn)品介紹 |
產(chǎn)品簡介
膠回收試劑盒利用硅基質(zhì)材料在高鹽緩沖系統(tǒng)對 DNA 高效、專一吸附的原理，配備自主研發(fā)的膜結(jié)合液（又稱溶膠液）和高性能的硅膠膜離心吸附柱，可在 15 分鐘內(nèi)清除凝膠、核酸染料及其他雜質(zhì)，高效回收 DNA 片段。本試劑盒配套的膜結(jié)合液和離心吸附柱的最大吸附量為 20μg，對 100-10000 bp 線性雙鏈 DNA 片段的回收效率可高達(dá) 50-90%，也可用于單鏈 DNA 片段和質(zhì)粒 DNA 的純化。因回收率受 DNA 片段大小、濃度等因素的綜合影響，故應(yīng)盡量加大電泳的 DNA 片段濃度，以提高回收率?；厥蘸蟮?DNA 片段可以直接用于酶切、連接、測序、標(biāo)記、雜交和體外轉(zhuǎn)錄等多種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。
回收效率 50 bp 回收效率：30~50% 100-200 bp 回收效率：50~70% 200-5000 bp 回收效率：70~90% 5 kb-10 kb 回收效率：50~70% 產(chǎn)品組份 膜結(jié)合液（MB）：25ml (50T) 膜漂洗液（MW）：15ml (50T) 初次使用前請按瓶標(biāo)說明加入無水乙醇混勻 洗脫緩沖液（EB）：10ml (50T) 離心吸附柱及收集管：50 (50T) 室溫密閉干燥保存 實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備 用戶需自行準(zhǔn)備的材料：無水乙醇，異丙醇，臺式離心機(jī)。 初次使用本試劑盒，請按瓶標(biāo)說明向膜漂洗液（MW）中加入相應(yīng)體積的無水乙醇（用戶自備），并在試劑瓶上做標(biāo)記。 操作步驟 1. DNA 結(jié)合：按每 1 μl DNA 樣品加入 1 μl 膜結(jié)合液（MB）的比例（1:1）加入膜結(jié)合液，混勻后轉(zhuǎn)移到插入收集管的離心吸附柱內(nèi)，室溫靜置 1 分鐘，室溫下≥12,000 x g 離心 1 分鐘，棄除收集管中的廢液，將離心吸附柱重新插回收集管中。離心吸附柱的最大吸附量為 20 μg，每次最多可離心 950 μl 溶液，如溶液體積大于 950 μl，可分批轉(zhuǎn)移到同一吸附柱內(nèi)，分次離心；若樣品體積低于 50μl，可用滅菌蒸餾水或洗脫緩沖液（EB）補(bǔ)足至 50 μl，再加入 50 μl 的膜結(jié)合液（MB）。為增加小片段的回收效率，當(dāng)回收的 DNA 片段小于 300 bp 時，或大于 3000bp 時，可加入 1：1 體積的異丙醇。 2．清洗：加入 700 μl 膜漂洗液（MW，請確認(rèn)已加入無水乙醇）于離心吸附柱中，室溫下≥12, 000 x g 離心 30 秒，棄除收集管中的廢液，將離心吸附柱重新插回收集管中。 3．再次清洗：加入 500 μl 膜漂洗液（MW）于離心吸附柱中，重復(fù)離心一次。棄除廢液后，將離心吸附柱去蓋再次離心 1 分鐘，徹底去除殘余漂洗液。 4．洗脫：小心取出離心吸附柱，將其套入一個新的 1.5 ml 滅菌離心管中。向硅膠吸附膜的中央加入 30 μl 洗脫緩沖液（EB），室溫靜置 1 分鐘后，≥12,000 x g 離心 1 分鐘收集純化的 DNA 片段。為提高回收片段濃度，離心收集后可將洗脫后的溶液再次加入離心吸附柱中重復(fù)洗脫一次，可提高約 20%的產(chǎn)量；如必須使用無菌去離子水洗脫，需注意其 pH 值是否接近中性，否則應(yīng)使用 NaOH 溶液將 pH 值調(diào)節(jié)至 7.0-8.5 之間。 5．儲存：棄除離心吸附柱，獲得的 DNA 片段可直接用于后續(xù)反應(yīng)或于-20℃長期保存。 |
