產(chǎn)品編號 | C6122 |
英文名稱 | Nucleic Acid and Protein Stabilization Reagent for Animal Tissue |
中文名稱 | 動物組織核酸、蛋白穩(wěn)定保存液 |
別 名 | Animal Tissue Nucleic Acid and Protein Stabilization Reagent; RNAstable; |
克 隆 號 | |
CAS | |
理論分子量 | kDa |
檢測分子量 | |
保存條件 | 室溫保存。如果使用時發(fā)現(xiàn)有沉淀析出,37?C 加熱重新溶解,不影響使用。 |
注意事項 | This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications. |
產(chǎn)品介紹 |
產(chǎn)品簡介: 動物組織核酸、蛋白穩(wěn)定保存液(Animal Tissue Nucleic Acid and Protein Stabilization Reagent; RNAstable;)適用于動物組織(心,肝,腎,肌肉,睪丸,腦,脾等)、培養(yǎng)細胞、RNA 病毒、果蠅、細菌、白細胞、全血、一些植物組織等樣本的保存。本產(chǎn)品是一種水相的,無毒的組織保存液體,可以迅速滲入新鮮組織細胞的胞漿中,在非凍狀態(tài)下原位穩(wěn)定和保護細胞內的RNA。取下組織薄片后立刻浸入動物組織核酸、蛋白穩(wěn)定保存液保存并不影響將來提取RNA的質量和數(shù)量。RNAstable消除了RNA樣品需要立刻處理或者必須液氮保存的不方便。浸入RNAstable后,新鮮組織細胞中RNA可以完好的在37?C下保存一天, 在25?C下保存一周, 4?C下保存一個月, 在-20?C或-80?C下長期保存。RNA 病毒樣品(如HCV 和HIV)可在37?C保存一個月。 產(chǎn)品優(yōu)勢: 1. 操作簡易:將組織剪成適當大小,浸沒在RNAstay中即可使其RNA不被降解。 2. 無需液氮:使樣品的保存不需液氮,干冰或-80?C冰箱, 尤其適用于臨床和野外樣品的快速和大規(guī)模采集。 3. 方便運輸:處理過的樣品能在25?C保存一周, 使樣品郵寄和運輸變得容易和便宜, 有利學術合作和交流。 4. 多次凍融: 經(jīng)RNAstable處理的樣品可反復凍融多次, 其間可對樣品進行各種處理而不影響最終提取的RNA的質量。 5. 穩(wěn)定性強: RNAstable能減少大規(guī)模樣品處理中的誤差, 增加各次實驗數(shù)間的可比性,對大規(guī)模基因表達譜的分析尤其有用。 6. 兼容性廣: 多種總RNA提取試劑都可以用來提取保存在RNAstable內的樣品。還可直接用于組織切片, 免疫學和流式細胞分析而不影響RNA提取的質量。 產(chǎn)品優(yōu)勢: RNAstable只用于新鮮組織,浸泡入RNAstable前請勿冷凍組織!只需迅速將新鮮組織剪成長,寬,高任意一邊厚度<0.5cm大小塊浸入RNAstable即可(RNAstable浸透力強,只需一邊厚度不超過0.5cm即可)。將新鮮組織浸泡在5倍體積的RNAstable中,按指示存放在合適的溫度。 1. 動物組織 RNAstable并不破壞或者溶解組織結構,因此浸泡在RNAstable中達到滲透平衡的組織可以從RNAstable中取出,然后切成更小的塊,然后放回RNAstable中,下次繼續(xù)使用。小器官如小鼠肝、腎和脾不需要剪切,可以完整的存放在RNAstable中。 2. 植物組織 很多植物組織直接浸泡到RNAstable即可,某些植物有天然滲透屏障如蠟質保護層,需要先破壞蠟質層,便于RNAstable滲透。 3. 組織培養(yǎng)細胞 細胞被吹打下來后,離心收集細胞,棄上清,用冰浴的PBS緩沖液洗一次,去除殘留培養(yǎng)液。將細胞懸浮在少量PBS緩沖液中,加入5-10倍體積的RNAstable,混勻。 4. 血和血漿 紅細胞和從血清中分離的白細胞可以用組織培養(yǎng)細胞保存方法一樣進行保存。RNAstable也可以保存抗凝全血、血清和血漿。對于全血加入3倍體積的RNAstable,混勻。 5. 酵母 離心收集3x108細胞(>12,000g離心2分鐘),立刻將細胞團重懸在0.5-1ml的RNAstable中。酵母細胞可以保存在RNAstable中25?C 8小時,4度一周。如果需要保持更長時間,將酵母細胞放在RNAstable中放置一個小時后,再次>12,000g離心5分鐘,將酵母細胞團放入液氮,瞬時冷凍后置于-80?C保存。 6. 細菌 RNAstable不破壞細菌,但是細菌也不能在RNAstable中生長。細菌在RNAstable中保存一個月仍舊可以提出完整的RNA。 RNAstable中樣本保存: 1. 存放在-80?C 此法可以長期保存樣本。將RNAstable中的樣本放于4?C過夜,然后將樣本撈出,盡量去除干凈RNAstable液體,然后放置于-80?C。對于組織培養(yǎng)細胞,則不需要去除RNAstable,直接冷凍于-80?C,并不會裂解細胞。樣本使用時可以在室溫融化,并且還可以再次冷凍而不影響RNA的完整性和產(chǎn)量。 2. 存放在-20?C 將RNAstable中樣本放置于4?C過夜,然后轉移到-20?C。在-20?C樣本不會被冰凍,但是可能會形成一些結晶,這并不會影響將來RNA提取。樣本使用時可以在室溫融化,并且還可以再次冷凍而不影響RNA的完整性和產(chǎn)量。 3. 存放在4?C 樣本可以存放在4?C一個月。 4. 存放在25?C 存放于25?C樣本的RNA在一周內保持完整,保存2周的樣品RNA有輕微降解,勉強能用于Northern 分析,但是質量足夠用于Nuclease Protection 分析或者RT-PCR分析。 5. 存放于37?C 存放于37?C樣本的RNA在24小時內保持完整,3天后有部分降解。 RNAstable中樣本的RNA提?。?/b> 將樣本從RNAstable中取出,RNAstable可以直接倒入水池,用自來水沖洗即可,不需要特殊處理。 1. 組織 用干凈鑷子將樣本從RNAstable中撈出,用吸水紙吸去殘留的RNAstable后,可以和新鮮組織一樣按照液氮研磨,然后勻漿處理,按后續(xù)標準程序進行RNA提取。 2. 細胞 對于保存在RNAstable中的細胞有兩種選擇,一是去除RNAstable后提取RNA,另一個是直接從細胞和RNAstable混合物中提取。 1)去除RNAstable后提取RNA 存放于RNAstable中的細胞可以承受較高的離心速度(約x5000g)而不破裂,由于每種細胞的強度不同,可以先用不重要的細胞做預實驗,以保證在使用的速度下離心不會破壞細胞。另外,可以在離心前加等體積的PBS稀釋RNAstable和細胞的混合物,以減少溶液密度,使細胞沉淀下來。 2)不去除RNAstable,直接提取RNA 可以直接加10倍體積的一步法RNA提取試劑(C06-01029)到細胞和RNAstable混合物中,然后按照標準程序提取RNA。 |
1、抗體溶解方法 | |
2、抗體修復方式 | |
3、常用試劑的配制 | |
4、免疫組化操作步驟 | |
5、免疫組化問題解答 | |
6、Western Blotting 操作步驟 | |
7、Western Blotting 問題解答 | |
8、關于肽鏈的設計 | |
9、多肽的溶解與保存 | |
10、酶標抗體效價測定程序 | |