| 產(chǎn)品編號(hào) | C6133 |
| 英文名稱 | RNAstable |
| 中文名稱 | RNA穩(wěn)定保存液 |
| 別 名 | RNA sample preservation solution; RNA preservation solution; RNA Storage solution; RNAstay; RNA Stabilization Solution; RNA穩(wěn)定和儲(chǔ)存溶液; RNA穩(wěn)定溶液; RNA樣本保存液; |
| 克 隆 號(hào) | |
| CAS | |
| 理論分子量 | kDa |
| 檢測(cè)分子量 | |
| 保存條件 | 室溫保存。 |
| 注意事項(xiàng) | This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications. |
| 產(chǎn)品介紹 |
簡(jiǎn)介： 適用于動(dòng)物組織（心，肝，腎，肌肉，睪丸，腦，脾等）、培養(yǎng)細(xì)胞、RNA 病毒、果蠅、細(xì)菌、白細(xì)胞、全血、一些植物組織等。RNAstable 是一種水相的，無(wú)毒的組織保存液體，可以迅速滲入新鮮組織細(xì)胞的胞漿中，在非凍狀態(tài)下原位穩(wěn)定和保護(hù)細(xì)胞內(nèi)的RNA。取下組織薄片后立刻浸入RNAstable保存并不影響將來(lái)提取RNA的質(zhì)量和數(shù)量。RNAstable消除了RNA樣品需要立刻處理或者必須液氮保存的不方便。浸入RNAstable后，新鮮組織細(xì)胞中RNA可以完好的在37?C下保存一天, 在25?C下保存一周, 4?C下保存一個(gè)月, 在-20?C或-80?C下長(zhǎng)期保存。RNA 病毒樣品(如HCV 和HIV)可在37?C保存一個(gè)月。 產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)： 1. 操作容易：將組織剪成適當(dāng)大小，浸沒(méi)在RNAstable中即可使其RNA不被降解。 2. 無(wú)需液氮：使樣品的保存不需液氮,干冰或-80?C冰箱, 尤其適用于臨床和野外樣品的快速和大規(guī)模采集。 3. 方便運(yùn)輸：處理過(guò)的樣品能在25?C保存一周, 使樣品郵寄和運(yùn)輸變得容易和便宜, 有利學(xué)術(shù)合作和交流。 4. 多次凍融：經(jīng)RNAstable處理的樣品可反復(fù)凍融多次, 其間可對(duì)樣品進(jìn)行各種處理而不影響最終提取的RNA 的質(zhì)量。 5. 穩(wěn)定性強(qiáng)：RNAstable能減少大規(guī)模樣品處理中的誤差, 增加各次實(shí)驗(yàn)數(shù)間的可比性,對(duì)大規(guī)模基因表達(dá)譜的分析尤其有用。 6. 兼容性廣：多種總RNA提取試劑都可以用來(lái)提取保存在RNAstable內(nèi)的樣品。還可直接用于組織切片, 免疫學(xué)和流式細(xì)胞分析而不影響RNA 提取的質(zhì)量。 使用說(shuō)明： RNAstable只用于新鮮組織，浸泡入RNAstable前請(qǐng)勿冷凍組織！只需迅速將新鮮組織剪成長(zhǎng)，寬，高任意一邊厚度<0.5cm大小塊浸入RNAstable即可（RNAstable浸透力強(qiáng)，只需一邊厚度不超過(guò)0.5cm即可）。將新鮮組織浸泡在5倍體積的RNAstable中，按指示存放在合適的溫度。 1. 動(dòng)物組織 RNAstable并不破壞或者溶解組織結(jié)構(gòu)，因此浸泡在RNAstable中達(dá)到滲透平衡的組織可以從RNAstable中取出，然后切成更小的塊，然后放回RNAstable中，下次繼續(xù)使用。小器官如小鼠肝、腎和脾不需要剪切，可以完整的存放在RNAstable中。 2. 植物組織 很多植物組織直接浸泡到RNAstable即可，某些植物有天然滲透屏障如蠟質(zhì)保護(hù)層，需要先破壞蠟質(zhì)層，便于RNAstable滲透。 3. 組織培養(yǎng)細(xì)胞 細(xì)胞被吹打下來(lái)后，離心收集細(xì)胞，棄上清，用冰浴的PBS緩沖液洗一次，去除殘留培養(yǎng)液。將細(xì)胞懸浮在少量PBS緩沖液中，加入5-10倍體積的RNAstable，混勻。 4. 血和血漿 紅細(xì)胞和從血清中分離的白細(xì)胞可以用組織培養(yǎng)細(xì)胞保存方法一樣進(jìn)行保存。RNAstable也可以保存抗凝全血、血清和血漿。對(duì)于全血加入3倍體積的RNAstable，混勻。 5. 酵母 離心收集3x108細(xì)胞（>12,000g離心2分鐘），立刻將細(xì)胞團(tuán)重懸在0.5-1ml的RNAstable中。酵母細(xì)胞可以保存在RNAstable中25?C 8小時(shí)，4度一周。如果需要保持更長(zhǎng)時(shí)間，將酵母細(xì)胞放在RNAstable中放置一個(gè)小時(shí)后，再次>12,000g離心5分鐘，將酵母細(xì)胞團(tuán)放入液氮，瞬時(shí)冷凍后置于-80?C保存。 6. 細(xì)菌 RNAstable不破壞細(xì)菌，但是細(xì)菌也不能在RNAstable中生長(zhǎng)。細(xì)菌在RNAstable中保存一個(gè)月仍舊可以提出完整的RNA。 RNAstable中樣本保存 1. 存放在-80?C 此法可以長(zhǎng)期保存樣本。將RNAstable中的樣本放于4?C過(guò)夜，然后將樣本撈出，盡量去除干凈RNAstable液體，然后放置于-80?C。對(duì)于組織培養(yǎng)細(xì)胞，則不需要去除RNAstable，直接冷凍于-80?C，并不會(huì)裂解細(xì)胞。樣本使用時(shí)可以在室溫融化，并且還可以再次冷凍而不影響RNA的完整性和產(chǎn)量。 2. 存放在-20?C 將RNAstable中樣本放置于4?C過(guò)夜，然后轉(zhuǎn)移到-20?C。在-20?C樣本不會(huì)被冰凍，但是可能會(huì)形成一些結(jié)晶，這并不會(huì)影響將來(lái)RNA提取。樣本使用時(shí)可以在室溫融化，并且還可以再次冷凍而不影響RNA的完整性和產(chǎn)量。 3. 存放在4?C 樣本可以存放在4?C一個(gè)月。 4. 存放在25?C 存放于25?C樣本的RNA在一周內(nèi)保持完整，保存2周的樣品RNA有輕微降解，勉強(qiáng)能用于Northern 分析，但是質(zhì)量足夠用于Nuclease Protection 分析或者RT-PCR分析。 5. 存放于37?C 6. 存放于37?C樣本的RNA在24小時(shí)內(nèi)保持完整，3天后有部分降解。 RNAstable中樣本的RNA提取 將樣本從RNAstable中取出，RNAstable可以直接倒入水池，用自來(lái)水沖洗即可，不需要特殊處理。 1. 組織 用干凈鑷子將樣本從RNAstable中撈出，用吸水紙吸去殘留的RNAstable后，可以和新鮮組織一樣按照液氮研磨，然后勻漿處理，按后續(xù)標(biāo)準(zhǔn)程序進(jìn)行RNA提取。 2. 細(xì)胞 對(duì)于保存在RNAstable中的細(xì)胞有兩種選擇，一是去除RNAstable后提取RNA，另一個(gè)是直接從細(xì)胞和RNAstable混合物中提取。 （1） 去除RNAstable后提取RNA 存放于RNAstable中的細(xì)胞可以承受較高的離心速度（約x5000g）而不破裂，由于每種細(xì)胞的強(qiáng)度不同，可以先用不重要的細(xì)胞做預(yù)實(shí)驗(yàn)，以保證在使用的速度下離心不會(huì)破壞細(xì)胞。另外，可以在離心前加等體積的PBS稀釋RNAstable和細(xì)胞的混合物，以減少溶液密度，使細(xì)胞沉淀下來(lái)。 （2） 不去除RNAstable，直接提取RNA 可以直接加10倍體積的一步法RNA提取試劑（C06-01029）到細(xì)胞和RNAstable混合物中，然后按照標(biāo)準(zhǔn)程序提取RNA。 |
