產(chǎn)品編號(hào) | D10389 |
英文名稱(chēng) | X-GAL |
中文名稱(chēng) | 5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷 |
別 名 | 5-Bromo-4-chloro-3-indolyl beta-D-galactopyranoside; 5-Bromo-4-chloro-3-indolyl β-D-galactopyranoside; 5-Bromo-4-chloro-3-indolyl β-D-galactoside; 5-溴-4氯-3-吲哚基-β-D-半乳糖苷; 5-溴-4-氯-3-吲哚 β-D-半乳糖苷; X-gal/BCIG; |
克 隆 號(hào) | |
CAS | 7240-90-6 |
理論分子量 | kDa |
檢測(cè)分子量 | |
保存條件 | Store at -20℃. |
注意事項(xiàng) | This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications. |
產(chǎn)品介紹 |
CAS號(hào):7240-90-6 分子式:C14H15BrClNO6 分子量:408.63 MDL:MFCD00005666 級(jí)別:超純 純度:>99% 外觀(guān)/性狀:白色至淺黃色粉末 溶解性:溶于DMSO,溶解度可達(dá)20mg/mL。也溶于DMF。 敏感性:對(duì)光敏感,易吸潮 用途:X-Gal是β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)的顯色底物,在β-半乳糖苷酶的催化下會(huì)產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物。常用于β-半乳糖苷酶的原位染色檢測(cè)以及藍(lán)白斑篩選。 配制儲(chǔ)存液: 稱(chēng)取200mg X-Gal于15 mL 離心管,向其中加入10mL DMF,旋渦震蕩使其充分溶解后,建議分裝,-20℃避光保存,有效期可達(dá)6-12個(gè)月。 藍(lán)白斑篩選: 1. X-Gal、IPTG 加入瓊脂培養(yǎng)基溶液 1)高壓滅菌已加瓊脂的培養(yǎng)基,并冷卻到50℃左右。 2)每毫升培養(yǎng)基內(nèi)加入10 μL 20 mg/mL X-gal溶液、10 μL 0.1 M的IPTG(使其終濃度達(dá)到1 mM); 3)加入適量抗生素; 4)混勻后按照平板大小倒入適量培養(yǎng)基,待培養(yǎng)基冷卻至室溫后,接種細(xì)菌于37℃過(guò)夜培養(yǎng)。 2. X-Gal、IPTG加到瓊脂平板表面 1)于無(wú)菌超凈工作臺(tái)制備平板(如LB 瓊脂板); 2)取40 μL 100 mM IPTG和120 μL 20 mg/mL X-gal混合,均勻地涂布于準(zhǔn)備好的平板上; 注:平板邊緣較難充分涂布均勻,容易產(chǎn)生假陽(yáng)性,因此,為了得到更好結(jié)果,建議后續(xù)操作中盡可能在平板中間挑取單克隆。 3)37℃孵育直至所有液體被吸收(30 min或更長(zhǎng))。接種細(xì)菌于37℃過(guò)夜培養(yǎng)。 |