免疫組化(IHC) 作為實(shí)驗(yàn)必備技能之一，具有特異性強(qiáng)，靈敏度高，將形態(tài)、功能和定位密切結(jié)合等優(yōu)勢(shì)，現(xiàn)已成為臨床病理不可或缺的輔助手段。但其實(shí)驗(yàn)步驟繁瑣，存在許多變量，經(jīng)常很難獲得最優(yōu)的結(jié)果，因此需要對(duì)一些實(shí)驗(yàn)流程的變量（例如樣品制備、抗原修復(fù)以及抗體孵育時(shí)間等）進(jìn)行調(diào)整實(shí)現(xiàn)優(yōu)化。
IHC實(shí)驗(yàn)步驟繁瑣，包括切片制作（固定，脫水，透明，包埋，切片，貼片，烤片），脫蠟，水化，阻斷，抗原修復(fù)，封閉，一抗孵育，二抗孵育，顯色，復(fù)染，封片和分析等，在上次的推文中向您介紹了封閉和一抗孵育兩個(gè)步驟中的常見問題及解析，本次為您帶來的是二抗孵育和顯色過程中的注意事項(xiàng)。文末還附有IHC通關(guān)的秘密武器——Bioss全新上市的IHC即用型試劑盒，助您一次獲得CNS級(jí)的圖像結(jié)果。
二抗孵育
1.陽性檢測(cè)率及著色強(qiáng)度相對(duì)減弱，甚至無染色
2.圖片背景值過高
3.染色結(jié)果出現(xiàn)非特異性染色
4.DAB顯色時(shí)間很短（如幾秒或幾十秒）就出現(xiàn)很深的棕褐色
顯色
1.陽性檢測(cè)率及著色強(qiáng)度相對(duì)減弱，甚至無染色
2.圖片背景值過高
3.產(chǎn)生深棕至黑色的DAB絮狀或團(tuán)狀沉積
4.陽性檢測(cè)率及著色強(qiáng)度相對(duì)增強(qiáng)
5.切片著色不均勻，如一片著色，一片不著色或著色深淺不一
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受篇幅限制，本次IHC實(shí)驗(yàn)過程中的常見問題解析就先分享到這里。如果您還想更深入的學(xué)習(xí)IHC相關(guān)問題，可以繼續(xù)關(guān)注本系列后續(xù)文章。Bioss供應(yīng)科研使用高品質(zhì)IHC抗體及全套配套試劑，為您提供一站式解決方案。如果您在使用我們的產(chǎn)品時(shí)出現(xiàn)任何問題，請(qǐng)隨時(shí)聯(lián)系我們，Bioss資深IHC實(shí)驗(yàn)專家將為您全面講解，深度分析，幫助您輕松解決IHC的“疑難雜癥”！
